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DEX对脓毒症大鼠肠黏膜上皮连接蛋白Occludin和闭合小环蛋白ZO-1表达的影响
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摘要:目的 旨在探究盐酸右美托咪啶(DEX)对脓毒症大鼠小肠黏膜上皮连接蛋白Occludin、闭合小环蛋白ZO-1表达的调控作用及其肠黏膜保护机制。 方法 实验将60只称重240~270g,7周龄,SPF级Wistar大鼠(雄性),利用随机数字法表法抽样将其分为3组(n=20):1.假手术(Sham)组、2.脓毒症(SEPSIS)组、3.盐酸右美托咪啶干预(DEX干预组)组。SEPSIS组、DEX干预组采用盲肠3号丝线穿线结扎、针头反复3次穿孔的方法建立病理模型,而SHam组仅开腹暴露找到盲肠,1/2处仅穿线不结扎,随后缝合关腹。经大鼠颈外静脉导管泵注盐酸右美托咪啶(DEX),负荷剂量5ug/kg,,10min输注完毕,后微量泵泵注小剂量0.5ug/kg/h 维持。SHam组、SEPSIS组则泵注等剂量的生理盐水,三组均于关腹缝合前停止泵注。次日晨经颈外静脉取血检测各组大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-(TNF-)浓度;取血后处死全部大鼠并取空回肠组织,苏木精-伊红染色法(HE staining)观察各组大鼠空回肠组织病理及通透性改变,计算出肠道损伤病理学评分(Chiu氏评分);同时进行细菌移位率测定;蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定小肠紧密连接蛋白(Occludin)、闭合小环蛋白(Zonula occludens1,ZO-1)的表达水平。结果 与SHam组比较,SEPSIS组血清TNF-、IL-6浓度升高,小肠黏膜Chiu氏评分、大鼠细菌移位率升高(P<0.05),Occludin、ZO-1表达水平降低(P<0.05);与SEPSIS组比较,DEX干预组血清TNF-、IL-6浓度降低,Chiu氏评分、细菌移位率降低(P<0.05),Occludin、ZO-1表达水平升高(P<0.05)。结论 DEX可减轻脓毒症致大鼠肠黏膜上皮细胞的损伤,与上调小肠黏膜Occludin、ZO-1表达水平有关。
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